【产品名称】
通用名称：核酸提取纯化试剂
英文名称：StrongStep® DNA/RNA Extraction Kit

【包装规格】
50人份/盒，100人份/盒。

【预期用途】
用于核酸的提取、富集、纯化等步骤。其处理后的产物用于临床体外检测使用。

【检验原理】
经裂解液裂解后，样本中核酸（DNA/RNA）释放，在高盐条件下被磁珠吸附，经洗涤液洗涤去除杂质后，以水洗脱下磁珠上的核酸，用于下游检测。

【主要组成成分】

羟基磁珠：300nm 硅羟基磁珠；
裂解液：异硫氰酸胍、十二烷基肌酸钠、柠檬酸钠、二硫苏糖醇、无核酸酶灭菌水；
去蛋白洗涤液I：异硫氰酸胍、无核酸酶灭菌水；
洗涤液II：氯化钠， Tris-HCl缓冲液、无核酸酶灭菌水；
无核酸酶灭菌水：分子级别。
本试剂盒不提供但必须具有的成分和设备：
无水乙醇（分析纯）
异丙醇（分析纯）
磁性分离器：需用户自备，可从南京黎明生物制品有限公司购买。

【储存条件及有效期】
2~8℃储存（可保存于室温）。
常温运输。
有效期：1年。
生产日期及失效日期见标签。

【使用方法】
首次使用前：
在去蛋白洗涤液 I中加入指定量（见瓶身标签）的异丙醇（分析纯），并于“□”内打上“√”，混匀后于室温下密闭保存。
在洗涤液 II中加入指定量（见瓶身标签）的无水乙醇（分析纯），并于“□”内打上“√”，混匀后于室温下密闭保存。
准备物品：
1.5 mL离心管：2个/样品（DNase/RNase-free）
单通道移液器：2 μL、20 μL、200 μL、1000 μL（DNase/RNase-free）
漩涡振荡器
恒温金属浴（或水浴锅）： 55℃
磁性分离器
操作步骤：
1. 裂解与结合
取一个新的1.5 mL离心管，加入200 μL样本，200μL 裂解液，400 μL异丙醇和20 μL 硅羟基磁珠，调整合适的转速漩涡振荡混合均匀，并将离心管置于55℃加热15 min（每隔5 min颠倒数次）（提取RNA不加热）。然后将离心管置于磁性分离器上静置1 min，用移液器吸去上清液。
2. 去蛋白洗涤
加入500 μL 去蛋白洗涤液I，用移液器缓慢吹打磁珠10次或漩涡震荡10 s，使磁珠充分重悬，将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清，用移液器移去上清液并取下离心管。
注：应尽量除尽洗涤液。
3. 洗涤
加入500 μL洗涤液II，用移液器缓慢吹打磁珠10次或漩涡震荡10 s，使磁珠充分重悬，将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清，用移液器移去上清液并取下离心管。
重复上洗涤步骤一次。
注：应尽量除尽洗涤液。
4. 干燥
保持离心管于磁性分离器上，将其置于超净工作台中风干至磁珠表面无明显光泽（2~4 min）。
5. 洗脱
加入20~50 μL无核酸酶灭菌水，用移液器缓慢吹打磁珠50次或漩涡震荡1 min，使磁珠充分重悬，于55℃加热（提取RNA室温放置）5 min后，将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清，转移上清液至新的离心管中，此即为纯化得到的病毒基因组，可保存于-20℃。

【产品性能指标】
1、 外观
试剂盒应组分齐全，包装外观清洁，无泄漏，无破损，标示/标签字迹清楚。
2、装量
每个容器装量应不少于其标签的标示值。
3、提取性能
3.1 纯度
DNA提取产物OD260/OD280 值在1.6-1.8之间；RNA提取产物OD260/OD280值在1.7-2.0之间。OD260/OD230大于2.0。
3.2 产量
加入已知量的DNA(RNA)，经试剂盒提取后，根据产物OD260数值，计算回收后的产物量，与加入量进行比较，提取回收率不小于80%。
3.3 完整度
以琼脂糖电泳检测片段完整度，结果应为单一条带。
3.4 线性范围
对浓度为10IU/mL～1.0E+08IU/mL的HBV样本进行提取，经定量PCR检测结果呈线性R2大于0.9。
对浓度为10IU/mL～1.0E+08IU/mL的HCV样本进行提取，经定量PCR检测结果呈线性R2大于0.9。
3.5 精密度
重复提取样本PCR检测结果Ct值的CV值小于5%。
4、重复性
同一实验室，同一操作员，重复提取10个平行样本，分别计算产量、纯度和完整度的精密度，RSD应小于5%。
5、再现性
再现性条件下提取核酸的产量、纯度和完整度的RSD值小于5%

【注意事项】
1. 操作之前，请务必认真阅读本产品手册。
2. 避免对磁珠进行冷冻、离心等操作。
3. 磁珠用前应充分重悬均匀。
4. 磁珠干燥前，用移液器吸尽洗涤液。
5. 干燥过程中避免磁珠过度干燥，否则会严重降低核酸洗脱效率。
6. 建议使用质量较好的离心管和移液器吸头，避免因粘附磁珠而造成损失。
7. 在96孔板中进行磁性分离操作时，磁珠吸附时间可适当延长。

【基本信息】
备案人/生产企业名称：南京黎明生物制品有限公司
住所：南京市玄武区蒋王庙 116-1 号
联系方式：
1.邮政编码：210042
2.电话：025-85476723，85422069
3.传真：025-85476387
4.网址：www.limingbio.com
售后服务单位名称：南京黎明生物制品有限公司
生产地址：南京市玄武区花园路 12 号
生产备案凭证编号：
【医疗器械备案凭证编号/产品技术要求编号】
【说明书核准日期及修改日期】
发布时间：2020.07.12 版本号：1.0